SAM 510:SAM甲基轉移酶檢測是一種連續(xù)動力學酶偶聯(lián)檢測，可連續(xù)監(jiān)測純化的SAM依賴性甲基轉移酶，無需使用放射性標記或終點測量。這是一種靈敏的蛋白質甲基化轉移酶的酶偶聯(lián)分析。

關鍵生物分子和蛋白質的甲基化在許多生物系統(tǒng)中起著重要作用，包括信號轉導、生物合成、蛋白質修復、基因沉默和染色質調節(jié)。

S-腺苷甲硫氨酸（SAM）依賴性甲基轉移酶使用SAM，這是僅次于ATP的第二種常用的酶輔因子。SAM，也稱為AdoMet，充當?shù)鞍踪|和DNA修飾所需的甲基基團的供體。SAM水平異常與許多異常有關，包括阿爾茨海默氏癥、抑郁癥、帕金森氏癥、多發(fā)性硬化癥、肝衰竭和癌癥。

圖1概述了檢測的總體方案。基本上，從SAM中去除甲基會產(chǎn)生S-腺苷高半胱氨酸，其通過所包含的腺苷高半胱氨酸核苷酶快速轉化為S-核糖高半胱氨酸和腺嘌呤。這種快速轉化防止了腺苷高半胱氨酸的積累及其對甲基化反應的反饋抑制。最后，腺嘌呤通過腺嘌呤脫氨酶轉化為次黃嘌呤，次黃嘌呤又轉化為尿酸鹽和過氧化氫。過氧化氫的生成速率通過在510納米處吸光度的增加用比色分析來測量。

由于腺苷高半胱氨酸核苷酶的特異性，該測定可適用于任何純化的SAM依賴性甲基轉移酶或產(chǎn)生5-腺苷高半胱氨酸或5’-甲硫腺苷的純化酶。

該試劑盒配有足夠用于100 x 115 l微孔檢測的試劑。

A 熒光SAM甲基轉移酶分析也是可用的。

特征

• 純化甲基轉移酶的動力學分析或篩選甲基化抑制劑。
• 用于動力學研究的連續(xù)酶偶聯(lián)分析。
• 比色、非放射性分析。
• 提供所有試劑，包括陽性質控品。
• 適用于產(chǎn)生S-腺苷高半胱氨酸或5’-甲硫腺苷的酶。

應用程序

• 用于蛋白質SAM甲基轉移酶的動力學分析。
• 甲基轉移酶抑制劑篩選的理想選擇。